多克隆抗体

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多克隆抗体 2019-08-28T10:52:41+08:00

多克隆抗体定制

选择单克隆抗体还是多克隆抗体,首先要确定所需抗体的用途。

多克隆抗体来自多个B细胞克隆,广泛应用于:免疫印迹法;放射免疫分析法;酶联免疫吸附试验;间接/直接免疫荧光抗体试验;红细胞凝集试验;免疫组织化学(IHC);免疫沉淀法(IP);免疫扩散、亲和层析等。

此外,多克隆抗体的生产时间短,成本低。

主要生产要点

  • 抗原的选择

     抗原类型包括肽、重组蛋白、细胞、质粒DNA等,所选抗原的质量和类型直接关系到能否获得抗体所需的特异性和实用性。

  • 动物种类的选择

     选择合适的动物种类应考虑以下几个方面:抗体与抗原的亲缘关系;抗体的用途;抗体反应的特异性;需要的血清量;动物的年龄和性别等。

  • 佐剂的选择

      对于多克隆抗体的生产,佐剂可分为抗原传递系统(包括乳剂和脂质体)和免疫增强剂(如胞壁二肽)。目前已有100多种佐剂,使用最广泛的佐剂  有:弗氏佐剂、TiterMax, RAS, Gerbu, Imject

  • 纯化

      抗体的最终用途决定了纯化方法。如果纯度要求不高,快速沉淀法快速且便宜。如果抗体用于诊断,比较适合使用蛋白A/G纯化法。如果抗体需要高纯度和高特异性,可采用抗原亲和纯化。

  • 检测

      检测方法主要有:SDS-PAGE法、蛋白质印迹法、等电聚焦法和酶联免疫吸附试验法。除了需要检测最终产品外,还需要在生产过程中检测血清抗体滴度。